产品特点
◎逆转录和定量PCR在一个反应管内一步完成,操作简便快速;
◎使用化学修饰的热启动聚合酶,反应特异性高,有效避免了非特异扩增;
◎反应缓冲液经充分优化,灵敏度高,zui低可检测1pg总RNA中的目标片段,特别适合低拷贝RNA的检测。
产品介绍
BIOGHC Elitefast SYBR One Step Kit专为以RNA为模板的定量PCR检测而设计。使用BIOGHC Elitefast SYBR One Step Kit,逆转录和定量PCR在一个反应管内一步完成,中间无开管和移液动作,操作非常简便,也大大提高了实验的效率,并降低了反应的污染风险。BIOGHC Elitefast SYBR One Step Kit使用我们研制优化的缓冲液,确保了RT和定量PCR反应能够快速、地完成。BIOGHC Elitefast SYBR One Step Kit的检测灵敏度可达到1pg总RNA,与其它品牌的同类产品相比,具有更高的检测灵敏度。各反应成分以Master Mix的形式提供,非常方便实验者使用。
产品成分 反应体系
组 分 | 100个反应 | 250个反应 |
RNase free ddH2O | 1ml | 1.25ml×2 |
2×BIOGHC Elitefast SYBR Mix | 1ml | 1.25ml×2 |
BIOGHC Elitefast Enzyme Mix | 100μl | 250μl |
50×ROX Reference Dye | 40μl | 100μl |
2xBIOGHC Elitefast SYBR Mix | 10μl |
BIOGHC Elitefast Enzyme Mix | 1μl |
上下游引物 (10μM) | 各0.4μl |
模板RNA | 10ng-1μg |
50 × ROX | 0.4μl |
RNase free ddH2O | 加至20µl |
说明:1、BIOGHC Elitefast SYBR Mix包含dNTP Mix、Mg2+、SYBR Green I;BIOGHC Elitefast Enzyme Mix包含BIOG超级逆转录酶、RNase 抑制因子和BIOG热启动聚合酶。2、一般来说反应体系中引物终浓度为0.2μM可得到较好的扩增效果。当反应结果不理想时,可以在0.1-1.0μM范围内调整引物浓度。3、qPCR反应灵敏性高,模板量的准确性对结果影响很大,建议将模板适度稀释后加入。4、扩增产物长度请选择在100bp-500bp范围内。 6、反应条件:先于50℃逆转录反应30分钟,再于95℃加热10分钟,以激活热启动DNA聚合酶,然后95℃ 15秒,60℃ 35秒,进行40个循环。该反应条件可根据目标片段的大小、引物的Tm值等适当调整。
储存和稳定性
干冰或蓝冰运输,-20°C避光保存,避免反复冻融 。
有效期
-20℃保存条件下,有效期为1年。
质量控制
所有组分经检测均无核酸外切酶,核酸内切酶,RNase残留。
注意
本产品仅用于科研