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血浆RNA提取使用注意事项都有哪些?
血浆RNA提取使用注意事项都有哪些?
发表时间:2023-03-03 点击次数:207
血浆RNA提取
技术是一种分子生物学技术,用于从血浆中提取RNA分子。这种技术的应用领域非常广泛,包括基础研究、临床诊断、药物开发等。
血浆RNA提取操作流程:
1.收集血浆样本。
2.加入RNA稳定剂,保护RNA不被酶降解。
3.用离心管将血浆样本离心,使血浆与RNA稳定剂混合均匀。
4.从混合液中提取RNA。
5.净化RNA,除去杂质。
6.测定RNA的浓度和品质。
血浆RNA提取使用注意事项都有哪些?
1. 样本收集:血浆需要新鲜采集,应尽量避免应激、高压、饮食等因素对样本的影响。
2. 样本处理:应用抗凝剂,如EDTA稳定血浆中的RNA,需要快速离心、去除沉淀、转移至无RNase污染的离心管中并保存在液氮中。
3. RNA提取:提取RNA时需要注意避免RNase污染,最好工作时实施塑料套裹或穿戴不含RNase的手套,容器和仪器也应预先进行RNase去除操作。
4. RNA质量检测:血浆中RNA含量较低,提取后应该根据实验需要进行定量和纯度检测。
5. RNA质量保证:因为血浆中RNA分解快,必须遵守几个必要的操作规程,例如提取后迅速检测RNA的浓度和纯度,及时冷冻并储存,同时采用RNA稳定剂保持RNA的完整性,避免RNase处理以保证RNA的完整性。
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