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荧光定量PCR试剂定量原理和产品特点
荧光定量PCR试剂定量原理和产品特点
发表时间:2023-02-02 点击次数:154
荧光定量PCR
是指在PCR扩增反应体系中加入荧光基团,通过对扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
荧光定量PCR试剂定量原理:
PCR扩增曲线共分为三个阶段,分别为荧光背景信号阶段、荧光信号指数扩增阶段和平台期,在荧光信号指数扩增阶段,PCR产物量的对数值与起始模板量之间存在线性关系,故选择在此阶段进行定量分析,由此引入Ct值的概念,Ct值的定义是每个反应管内的荧光信号到达设定域值时所经历的循环数。利用已知拷贝数的标准品可作出标准曲线,其中横坐标代表起始拷贝数的对数,纵坐标代表Ct值。因此,只要获得未知样品的Ct值,即可从标准曲线上计算出该样品的起始拷贝数。
荧光定量PCR试剂产品特点:
1、使用抗体修饰的热启动聚合酶,反应特异性高,可有效避免非特异扩增。
2、反应缓冲液经充分优化,反应灵敏度高,CT值较同类试剂盒早1-2个。
3、抗干扰能力强,即使是血液、肿瘤、菌落等复杂样本,也能获得较为理想的结果。
4、反应体系经充分优化,具有优异的反应稳定性,特别适合于各类科研和检测试剂盒开发。
5、干扰能力强,适合对土壤、粪便、肿瘤和血液来源的复杂样本中的靶基因进行检测分析。
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