RNA纯化柱使用方法和注意事项分别是什么？

　　RNA纯化柱是常用的核酸纯化柱，用于RNA和miRNA的分离，不同层数用于不同核酸的提取和分离可达到好效果，具体层数客户可以自行测试配和缓冲液。纯化柱可以吸附RNA核酸，提取纯度高，对RT-PCR抑制小，可以配和IVD诊断试剂盒使用，能用于临床核酸的分离和检测，是大型生产厂家选择材料。

　　RNA纯化柱使用方法和注意事项：

　　使用方法：

　　按照提取试剂盒说明书操作，自行配置缓冲液上柱，漂洗，洗脱即可得到纯净的RNA。

　　注意事项：

　　上柱前溶液的PH值应在膜的结合范围，具体可以做梯度测试

　　洗涤液中的乙醇浓度不得低于50%。

　　最后洗脱，可以用RNase-free去离子水。

　　如果长期保存RNA，建议使用乙醇或异丙醇低温保存。

　　裂解后RNA的纯化：

　　1、有机溶剂抽提

　　常用的抽提纯化方式为酚氯仿抽提加乙醇沉淀，利用酚氯仿异戊醇溶剂对裂解体系进行反复抽提以去除蛋白质，实现核酸与蛋白质的分离；再用乙醇将核酸沉淀下来，实现核酸与盐的分离。

　　2、离心柱层析

　　核酸纯化的柱膜采用硅基材质在高盐、低pH值情况下吸附核酸；低盐、高pH值情况下释放核酸。采用离心柱法进行核酸提取获得的核酸的纯度和稳定性较高。缺点是提取效率较低，需要反复离心，操作复杂，难以进行较高通量的处理。

　　3、磁珠纯化

　　利用超顺磁性氧化硅纳米磁珠在微观界面上与核酸分子特异性地识别和高效结合的原理，能快速将血液、动物组织、食品、病原微生物等样本中的核酸快速分离出来。磁珠法结合提取仪能快速进行大量样本的核酸提取方便快捷是目前广泛应用的核酸提取方法。