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血液微生物核酸提取试剂盒提取纯化方法有以下这些
血液微生物核酸提取试剂盒提取纯化方法有以下这些
发表时间:2022-12-05 点击次数:203
血液微生物核酸提取试剂盒
基于磁珠分离纯化方式,适合于从全血中纯化高质量基因组DNA。磁珠在一定条件下对核酸具有很强的亲和力,而当条件改变时,磁珠会释放吸附的核酸,从而达到快速分离纯化核酸的目的。整个提取过程不涉及有机试剂,提取的基因组DNA片段大,纯度高,质量稳定可靠。
血液微生物核酸提取试剂盒提取纯化方法如下:
1、磁珠法
对超顺磁性纳米颗粒的表面进行改良和表面修饰后,制备成超顺磁性氧化硅纳米级磁珠。该磁珠能与核酸分子特异性结合。利用氧化硅纳米微球的超顺磁性,在Chaotropic盐和外加磁场的作用下,从血液、动物组织、食品、病原微生物等样本中分离出DNA和RNA。
2、酚/氯仿抽提法
通过酚/氯仿处理细胞破碎液或者组织匀浆后,在水相中主要溶解以DNA为主的核酸成分,在有机相中主要是脂类物质,蛋白质位于两相之间。
3、醇沉淀法
乙醇能够消除核酸的水化层,使带负电荷的磷酸基团暴露出来,Na之类的平衡离子能够与这些带电基团结合,在沉淀形成部位降低多核苷酸链之间的排斥作用,形成沉淀。
4、过柱法
通过特殊硅基质吸附材料,能够特定吸附DNA,然后利用高盐低PH结合核酸,低盐高PH值洗脱,来分离纯化核酸。
5、煮沸裂解法
加热处理DNA溶液时,线状染色体DNA容易发生变性,共价闭合的质粒DNA在冷却时即恢复其天然构象;变性染色体DNA片段与变性蛋白质和细胞碎片结合形成沉淀,而复性的超螺旋质粒DNA分子则以溶解状态存在液相中,从而可通过离心将两者分开。煮沸裂解法提取DNA,得量少,杂质多,DNA可能会出现断裂,主要适用于一些粗略的实验;
6、热裂解碱法
碱裂解法是基于DNA的变性与复性差异而达到分离目的的。碱性使质粒DNA变性,再将pH值调至中性使其复性,复性的为质粒DNA,而染色体DNA不会复性,缠结成网状物质,通过离心除去。
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